69PM053｜第69回 臨床検査技師国家試験 過去問

正答

1．FISH法

この問題のポイント

核酸配列に相補的なプローブを使う検査と、DNAや組織成分を一括して染める組織化学反応を区別します。

解説

FISH（fluorescence in situ hybridization、蛍光インサイチューハイブリダイゼーション）法は、目的とするDNA配列に相補的な蛍光標識プローブを、スライド上の細胞や組織内の核酸へ結合させる方法です。変性によって二本鎖DNAを一本鎖にし、プローブをハイブリダイズさせ、洗浄後に蛍光シグナルの数や位置を観察します。特定遺伝子の増幅・欠失、染色体数の異常、転座による再構成などを、細胞形態を残したまま検出できる点が特徴です。これに対しFeulgen反応はDNA全体、methyl green-pyronin染色はDNAとRNAを染め分けますが、塩基配列を識別しません。「特定の配列」という語があれば、相補性を利用する核酸プローブを思い出します。

選択肢の確認

1．正しい。FISH法は目的配列に相補的な蛍光標識プローブを用いるため、特定の遺伝子配列を検出できます。
2．誤り。DOPA反応は3,4-dihydroxyphenylalanineを基質としてチロシナーゼ活性を示し、メラノサイト系細胞の評価に用います。
3．誤り。Feulgen反応は酸加水分解後のDNAを選択的に染めますが、特定の遺伝子配列を識別する方法ではありません。
4．誤り。direct fast scarlet染色はアミロイドを検出する染色で、核酸配列の検出には用いません。
5．誤り。methyl green-pyronin染色はDNAを緑、RNAを赤系に染め分けますが、個々の塩基配列は識別しません。

覚えるポイント

• FISH法は相補的プローブで標的DNAの位置と数を可視化します。
• Feulgen反応はDNA全体を対象とし、配列特異性はありません。
• 「特定遺伝子」「増幅・欠失・転座」ではFISH法を考えます。