72PM047第72回 臨床検査技師国家試験 過去問

ホルマリン固定パラフィン包埋標本を用いた酵素抗体法の内因性ペルオキシダー ゼをブロックする試薬はどれか。

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正解: 5

正答

5

この問題のポイント

酵素抗体法で起こる非特異的発色と、内因性ペルオキシダーゼの阻害法を理解します。

解説

酵素抗体法でペルオキシダーゼを標識酵素として用いる場合、赤血球、顆粒球、肝細胞などに存在する内因性ペルオキシダーゼ活性が基質を発色させ、偽陽性の原因になります。これを過酸化水素加メタノールで前処理して失活させます。

一方、正常動物血清やカゼインは非特異的な抗体結合のブロッキング、クエン酸緩衝液やEDTAは加熱抗原賦活に用います。

選択肢の確認

1.EDTA
誤りです。
EDTAは主に加熱抗原賦活液や脱灰液として用い、内因性ペルオキシダーゼ阻害の主試薬ではありません。

2.カゼイン溶液
誤りです。
カゼイン溶液は蛋白性ブロッキング剤として非特異的結合を抑えます。酵素活性阻害とは目的が異なります。

3.正常動物血清
誤りです。
正常動物血清は二次抗体などの非特異的結合を抑えるブロッキングに用います。

4.クエン酸緩衝液
誤りです。
クエン酸緩衝液はホルマリン固定でマスクされた抗原を加熱により賦活する際に用います。

5.過酸化水素加メタノール
正しいです。
過酸化水素加メタノールは内因性ペルオキシダーゼを失活させ、非特異的発色を防ぎます。

覚えるポイント

  • 内因性ペルオキシダーゼ阻害は過酸化水素加メタノールです。
  • 正常血清・カゼインは非特異的蛋白結合のブロックです。
  • クエン酸緩衝液・EDTAは抗原賦活に用います。
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